是windows还是Linux平台，linux平台一般是写一个文件比如myps.pid，然后把自己的pid写进去，每次启动的时候读这个固定的文件，然后监测下有无对应的pid进程在，有的话，主动退出。你可以把这个pid写到/tmp目录下
windows可以用核心对象来判断，这个有代码支持的，自己简单写了下windows的测试代码，linux可以自行加上

# -*- coding: utf-8 -*-

import sys
import time
if sys.platform.startswith("win32"):
    from win32api import GetLastError
    from winerror import ERROR_ALREADY_EXISTS

ORG = "MyCompany"
APP_NAME = "MyAppName"


class Singleton(object):
    def __init__(self):
        if sys.platform.startswith("win32"):
            from win32event import CreateMutex
            self.mutexName = '%s.%s' % (ORG, APP_NAME)
            self.myMutex = CreateMutex(None, False, self.mutexName) //创建核心对象
            self.lastErr = GetLastError() //检查lasterr
        else:
            # 是linux平台,可以把文件固定写在/tmp下,每次读这个文件检查pid内容，看是否有同样的pid存在
            pass

    def isAlive(self):
        if sys.platform.startswith("win32"):
            if self.lastErr == ERROR_ALREADY_EXISTS: //如果LastError表示已经存在，则返回，表示进程表里有同样的进程存在
                return True
        else:
            # 检查
            return False